Vista torcida
Una evaluación con pulverizadores hidroneumáticos demostró que los ajustes básicos y fundamentales ya no son realizados por los operadores, lo que hace que la operación sea ineficiente.
El control biológico surgió como una alternativa racional, extremadamente necesaria e imprescindible a la agricultura actual. La manipulación del medio ambiente y la introducción de antagonistas, tanto en el suelo como en los órganos de propagación de las plantas, pueden garantizar el control biológico de los fitopatógenos del suelo. Entre los biocontroladores utilizados contra patógenos del suelo, se encuentran aislados silvestres y mejorados de Trichoderma spp. Este hongo es un micoparásito necrotrófico eficaz en el control de numerosos hongos fitopatógenos, especialmente aquellos con estructuras de resistencia consideradas difíciles de ser atacadas por microorganismos, como esporas, esclerocios, clamidosporas y microesclerocios. Los mecanismos de acción mediante los cuales el Trichoderma pueden actuar son: antibiosis, hiperparasitismo, competencia y también en algunos casos favoreciendo el crecimiento de las plantas. Con esta visión, es fundamental integrar el control biológico con otros métodos disponibles, como el uso y aumento de cobertura vegetal o paja, el control químico y variedades con resistencia o tolerancia parcial a enfermedades.
A pesar de ser considerado un hongo del suelo de vida libre, universalmente presente en este ambiente, en todas las zonas climáticas, algunas especies pueden ser cosmopolitas (ejemplo T. harzianum) o limitados en su distribución geográfica (ejemplo T. viride). Trichoderma estromático Tiene posiblemente la distribución más restringida entre las especies del género y sólo se encuentra asociada a las plantas de cacao o al agente patógeno. Crinipellis perniciosa, que provoca la escoba de bruja en el cacao. Una fuerte influencia en la distribución de especies de Trichoderma es la temperatura. Las especies de regiones frías tienen una temperatura óptima baja, como es el caso de Trichoderma virida e Trichoderma polisporo, que se desarrollan bien a 7°C, y Trichoderma minutisporum. Trichoderma koningii e Trichoderma hamatum soportar hasta
Tricodermas son conocidos por su alta capacidad para producir enzimas que degradan la celulosa y la quitina. En Filipinas, T. harzianum se inocula en pilas de abono para acelerar la degradación de la celulosa. Trichoderma reesei Fue considerada la especie más conocida para la producción comercial de celulasa. Además de la celulosa y la quitina, Tricodermas especies son capaces de degradar hidrocarburos, clorofenicol, polisacáridos y pesticidas xenobióticos utilizados en la agricultura. Cuestiones relacionadas con problemas ambientales y costos de producción son las principales razones de la actual expansión del mercado de control biológico en el país.
Trichoderma spp como descomponedor en el crecimiento de las plantas
Algunas especies de Trichoderma Pueden promover el crecimiento de las plantas, aumentar la germinación y la aparición de semillas y también pueden tener efectos positivos indirectos al aumentar el crecimiento de las plantas. Esto ocurre en una relación aparentemente simbiótica y no parasitaria entre el hongo y la planta, donde el hongo ocupa el nicho nutricional y la planta queda protegida de enfermedades. Después de desarrollarse en la espermosfera, Trichoderma especies Puede utilizarse en la inoculación de semillas, ya que termina siguiendo el desarrollo de la raíz de la nueva planta, contribuyendo al papel pionero del hongo en esta estructura. Especies de Trichoderma Producen ácidos orgánicos que reducen el pH del suelo y permiten la solubilización de fosfatos, micronutrientes y minerales como hierro, manganeso y magnesio, útiles para el metabolismo de la planta. El aumento del crecimiento de raíces o brotes aumenta la resistencia al estrés biótico o abiótico y a los cambios en estado nutrición vegetal.
Trichoderma spp como agente de biocontrol
El uso de Trichoderma especies ya ha sido documentado para el control de Rhizoctonia solani, Esclerocio rolfsii, Sclerotinia sclerotiorum, Fusarium spp. Es Pythium spp. Trichoderma virens es eficaz contra amortiguamiento, causa por S. esclerotiorum e Pythium ultimum e Rhizoctonia solani Kuhn. En el algodón, se ha informado de actividad de supresión contra Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum F. sp. vasinfectum.
Desde el punto de vista del biocontrol, T. harzianum e T. asperellum son las especies más estudiadas, además de otras especies como T. koningii, T. viride, T. hamatum, y T. pseudokoningii. Se informa actividad de biocontrol para poblaciones de Trichoderma de 105 107 UFC/g cultivado en un medio controlado, como suelo fumigado y aplicado al suelo en porciones de un litro/m2, con 108 esporas/litro. Los conidios y clamidosporas de Trichoderma Están formulados y utilizados para tratar suelos, semillas, bulbos y estolones, y también se pulverizan sobre la parte aérea de las plantas.
Mecanismos de acción Trichoderma spp en biocontrol
Supresión de una enfermedad mediada por agentes de biocontrol y éxito del controlador. Por tanto, comprender las relaciones entre organismos se encuentra entre los factores fundamentales para mantener el equilibrio natural de las poblaciones y los ciclos biológicos. En el hiperparasitismo, las especies de este género son capaces de detectar y localizar hifas de hongos susceptibles (Figura 2), tal vez en respuesta a estímulos químicos producidos por las hifas del huésped, formando estructuras similares a apresorios y enrollándose firmemente a lo largo de toda la longitud de las hifas para luego penetrarlo y digerirlo. Este mecanismo ya ha sido demostrado por varios investigadores a través de la interacción entre T. harzianum, Rhizoctonia solani, Pythium e Sclerotim rolfsii.
El arsenal antifúngico de Trichoderma Incluye una amplia variedad de enzimas líticas (ejemplo: exoglucanasa, endoglucanasa, celobioasa, celulasas, quitinasas, glucanasas), la mayoría de las cuales juegan un papel importante en el control biológico. Este hongo es capaz de parasitar y destruir incluso las estructuras de resistencia de los fitopatógenos, como los esclerocios de Sclerotinia sclerotiorum.
La interacción de Trichoderma con otros microorganismosanismos
Algunos aislados de Trichoderma especies inducir resistencia sistémica en plantas activando la síntesis de proteínas relacionadas con la patogénesis (PRP), incluso antes de que el patógeno invada la planta huésped. En muchos casos, el ácido salicílico y el ácido jasmónico, junto con el etileno o el óxido nitroso, inducen una cascada de eventos que desencadenan la producción de una amplia variedad de metabolitos y proteínas con diversas funciones en la planta, modificando el proteoma y la fisiología de la planta. La Figura 1 aclara los principales mecanismos de acción de Trichoderma en suelo, semillas y plantas.
Figura 1 - Acción de Trichoderma en suelo, raíces, semillas, partes vegetativas y plantas.
El grado de protección promovido por los aislados de Trichodermolas spp. que induce resistencia sistémica en las plantas, puede ser tan eficaz como el promovido por fungicidas. Por ejemplo, el grado de control promovido por Trichoderma hamatum – T 382 en contra Phytophthora capsici fue tan eficaz como el promovido por el fungicida metalaxyl.
La importancia de evaluar productos comerciales en función de Trichoderma
Trichoderma puede formularse en medio sólido (WP), gránulos dispersables en agua (WG) o aceite (E) o incluso suspensión concentrada (SC). La forma en que se utiliza el organismo vivo (esporas o conidios) es importante para mantener su viabilidad, ya sea mediante conservación en frío o almacenamiento a bajas temperaturas y en un ambiente adecuado. Este tipo de servicio es realizado por el Laboratorio de Micología y Sanidad Vegetal (Lamip), de la Universidad Federal de Uberlândia (UFU), desde hace siete años, con la prestación rutinaria de servicios a la comunidad agrícola y a las empresas del Triângulo Mineiro y Alto región de Paranaíba en Minas Gerais y en todo Brasil. También es importante comprobar si hay contaminación bacteriana, ya que su presencia reduce la vida útil del producto.
En la presente evaluación, los productos comerciales basados en Trichoderma spp fueron enviados por sus respectivas empresas. La Tabla 1 contiene una descripción de los bioproductos evaluados.
Tabla 1 - Descripción de los productos biológicos, ingrediente activo, formulación, concentración declarada en la etiqueta y empresa fabricante. UFU, Uberlândia, 2014
| Ingrediente activo | Formulación | Concentración Declarado | ||
| Trichoderma spp | PM | 1,0 x 10 8* | ||
| T. harzianum | WP | 5,0 x 10 10* | ||
| T. asperellum | WG | 1,0 x 10 10* | ||
| T. harzianum | SC | 2,0 x 10 9 ** |
Ingrediente activo
Formulación
Concentración
Declarado
Trichoderma spp
PM
1,0 x 10 8*
T. harzianum
WP
5,0 x 10 10*
T. asperellum
WG
1,0 x 10 10*
T. harzianum
SC
2,0 x 10 9 **
*ml de esporas-1 o esporas g-1
**conidias viables ml-1
Para analizar la viabilidad y concentración de los bioproductos, se realizaron diluciones seriadas de los productos en agua destilada y autoclavada, las cuales se sembraron en placas de Petri que contenían medio PDA (Patato-Dextrosa-Agar), incubándose durante cinco días a 22°C ±
Bioproductos (T. asperellum) Y (T. harzianum) no difirieron estadísticamente entre sí, mostrando ambos un 98% de germinación de esporas, seguidos de Trichoderma spp, con el 90%, y T. harzianum, con 60% de germinación (Cuadro 2). Respecto a la contaminación bacteriana del bioproducto (T. harzianum) mostraron mayor contaminación, a diferencia de los demás tratamientos. Cabe señalar que este análisis se realizó para un lote o muestra, el cual puede variar incluso para un lote o muestra dependiendo de cómo fue manipulado desde la producción, el transporte hasta la comercialización o incluso el almacenamiento.
Tabla 2 - Porcentaje de germinación y contaminación bacteriana de bioproductos. UFU, Uberlândia-MG, 2014
| Bioproductos | Porcentaje germinación | Contaminación por bacterias | ||
| (Trichoderma spp) | 90 | b | 3,0 x 10 6 | a |
| (T. harzianum) | 60 | c | 6,0 x 10 6 | b |
| (T. asperellum) | 98 | a | 5,0 x 10 5 | a |
| (T. harzianum) | 98 | a | 1,0 x 10 6 | a |
| CV (%) | 2,53 | 36,87 | ||
Bioproductos
Porcentaje
germinación
Contaminación
por bacterias
(Trichoderma spp)
90
b
3,0 x 10 6
a
(T. harzianum)
60
c
6,0 x 10 6
b
(T. asperellum)
98
a
5,0 x 10 5
a
(T. harzianum)
98
a
1,0 x 10 6
a
CV (%)
2,53
36,87
Las medias seguidas de la misma letra en la columna no difieren entre sí utilizando la prueba de Tukey, con un 5% de probabilidad.
En la Tabla 3 se puede observar que la concentración obtenida en la cámara de Neubauer es superior a la concentración declarada en la etiqueta, sin embargo, este valor no corresponde a la concentración real del bioproducto, ya que se contabilizan todas las esporas presentes, es decir, las esporas que germinarán y las que no germinarán, por lo que es importante medir la concentración en la placa, donde se puede observar que solo los bioproductos (T. asperellum) Y (T. harzianum) presentó concentraciones superiores a las declaradas.
Tabla 3 - Concentración y viabilidad de bioproductos. Uberlândia-MG, 2014
| Bioproductos | Concentración Declarado | Concentración en Cámara de Neubauer | Concentración a bordo | Diferencia entre concentración declarada | |
| Cámara de Neubauer | Placa | ||||
| Trichoderma spp | 1,0 x 10 8 | 7,5 x 10 9 | 1,0 x 10 7 | + 7,4 x 10 9 | - 9,0 x 10 7 |
| T. harzianum | 5,0 x 10 10 | 2,0 x 10 10 | 3,0 x 10 6 | - 3,0 x 10 10 | - 4,9 x 10 10 |
| T. asperellum | 1,0 x 10 10 | 9,0 x 10 10 | 5,0 x 10 10 | + 8,0 x 10 10 | + 4,0 x 10 10 |
| T. harzianum | 2,0 x 10 9 | 2,0 x 10 10 | 6,0 x 10 9 | + 1,8 x 10 10 | + 4,0 x 10 9 |
Bioproductos
Concentración
Declarado
Concentración en
Cámara de Neubauer
Concentración
a bordo
Diferencia entre concentración declarada
Cámara de Neubauer
Placa
Trichoderma spp
1,0 x 10 8
7,5 x 10 9
1,0 x 10 7
+ 7,4 x 10 9
- 9,0 x 10 7
T. harzianum
5,0 x 10 10
2,0 x 10 10
3,0 x 10 6
- 3,0 x 10 10
- 4,9 x 10 10
T. asperellum
1,0 x 10 10
9,0 x 10 10
5,0 x 10 10
+ 8,0 x 10 10
+ 4,0 x 10 10
T. harzianum
2,0 x 10 9
2,0 x 10 10
6,0 x 10 9
+ 1,8 x 10 10
+ 4,0 x 10 9
En el mercado hay Trichoderma Se vende en su sustrato de cultivo, que es molido y envasado. Esta formulación es más difícil de aplicar debido a la obstrucción de las boquillas. Tampoco permite una larga viabilidad del hongo, además de permitir una mayor contaminación por otros hongos y bacterias, reduciendo así su eficiencia en campo. Existen en el mercado otras formulaciones, como esporas puras, mezcladas en aceite, en suspensión concentrada o incluso en gránulos dispersables en agua (WG), que facilitan la aplicación. Con la aparición de formulaciones oleosas, esta formulación proporciona mayor estabilidad del ingrediente activo cuando se almacena a temperatura ambiente (24ºC - 26ºC). Además, presenta ventajas en cuanto a facilidad de aplicación y protección en el campo de la radiación UV. Es de suma importancia elegir un producto de calidad, combinado con una formulación que garantice eficiencia en la aplicación y control del moho blanco, causado por Sclerotinia sclerotiorum y otros patógenos transmitidos por el suelo, como Fusarium, Rizoctonia, macrofomina etc.
Verificación del hiperparasitismo de Trichoderma hablar sobre S. esclerotiorum
Entre los mecanismos de acción del antagonista, el hiperparasitismo puede ocurrir tanto por estrangulación como por penetración de las hifas. Trichoderma spp sobre el patógeno, lo cual se puede observar en las fotografías de microscopía electrónica de barrido (MEB) - Figura 2 -, donde todos los aislados analizados colonizan al patógeno, ya sea penetrando o estrangulando sus hifas, también se nota el crecimiento de hifas paralelas.
Figura 2 - Fotografía con micrografía electrónica de barrido de las interacciones entre Trichoderma spp y S. esclerotiorum, mostrando la estrangulación y penetración de las hifas antagonistas sobre el patógeno, respectivamente: a.1 y a.2) (Trichoderma spp); b.1 y b.2) (Trichoderma harzianum); c.1 y c.2) (Trichoderma asperellum); d.1 y d.2) (Trichoderma harzianum)
La secreción de enzimas constituye un paso esencial en el biocontrol de hongos.
Los dos tipos de interacciones verificadas en este trabajo, penetración y estrangulamiento, pueden interpretarse como acción hiperparasitaria. Para ambas especies, Trichoderma asperellum e T. harzianum, independientemente de la formulación y producto comercial estudiado, asociado al hongo patógeno S. esclerotiorum. Esta misma acción se observó en el emparejamiento de Trichoderma e Fusarium oxysporum y com T. harzianum e Rhizoctonia solani.
Selectividad de fungicidas a productos comerciales basados en Trichoderma
La tabla 4 presenta la selectividad. in vitro de los principales fungicidas disponibles en el mercado brasileño.
Tabla 4 - Selectividad de fungicidas comerciales en diferentes concentraciones para aislamientos de Trichoderma especies Uberlândia-MG, 2014
| fungicidas | PPM | Trichoderma | T. harzianum | T. asperellum | T. harzianum | |
| Testigo | 0,0 | + + + + | + + + + | + + + + | + + + + | |
| (tiofanato + fluazinano) | 0,1 | + + + | + + + | + + + + | ++ | |
| 1,0 | ++ | ++ | ++ | ++ | ||
| 10 | + | + | + | + | ||
| 100 | + | - | + | + | ||
| 1000 | - | - | - | - | ||
| (fluaizinano) | 0,1 | ++ | + | ++ | ++ | |
| 1,0 | ++ | + | ++ | ++ | ||
| 10 | + | + | ++ | + | ||
| 100 | + | + | ++ | + | ||
| 1000 | + | + | + | + | ||
| (tiofanato) | 0,1 | + + + + | + + + + | + + + + | + + + + | |
| 1,0 | + + + + | + + + + | + + + + | + + + + | ||
| 10 | + | + | + | + | ||
| 100 | + | + | + | + | ||
| 1000 | - | - | - | - | ||
| (tiofanato + fipronil + piraclostrobina) | 0,1 | + + + | + + + | + + + | + + + | |
| 1,0 | ++ | ++ | ++ | ++ | ||
| 10 | + | + | + | + | ||
| 100 | + | + | + | + | ||
| 1000 | - | - | - | + | ||
| (carbendazina) | 0,1 | + | + | + | + | |
| 1,0 | + | + | + | + | ||
| 10 | + | + | - | + | ||
| 100 | + | + | + | + | ||
| 1000 | - | + | - | + | ||
| fludioxonil + tiran) | 0,1 | ++ | + | + | + | |
| 1,0 | + | + | + | + | ||
| 10 | + | + | + | + | ||
| 100 | + | + | + | + | ||
| 1000 | + | + | + | + | ||
| (procimidona) | 0,1 | + + + + | + + + + | + + + | + + + + | |
| 1,0 | + + + | + + + | + + + + | + + + | ||
| 10 | + | + | + | ++ | ||
| 100 | + | + | ++ | ++ | ||
| 1000 | + | + | ++ | ++ |
fungicidas
PPM
Trichoderma
T. harzianum
T. asperellum
T. harzianum
Testigo
0,0
+ + + +
+ + + +
+ + + +
+ + + +
(tiofanato + fluazinano)
0,1
+ + +
+ + +
+ + + +
++
1,0
++
++
++
++
10
+
+
+
+
100
+
-
+
+
1000
-
-
-
-
(fluaizinano)
0,1
++
+
++
++
1,0
++
+
++
++
10
+
+
++
+
100
+
+
++
+
1000
+
+
+
+
(tiofanato)
0,1
+ + + +
+ + + +
+ + + +
+ + + +
1,0
+ + + +
+ + + +
+ + + +
+ + + +
10
+
+
+
+
100
+
+
+
+
1000
-
-
-
-
(tiofanato + fipronil + piraclostrobina)
0,1
+ + +
+ + +
+ + +
+ + +
1,0
++
++
++
++
10
+
+
+
+
100
+
+
+
+
1000
-
-
-
+
(carbendazina)
0,1
+
+
+
+
1,0
+
+
+
+
10
+
+
-
+
100
+
+
+
+
1000
-
+
-
+
fludioxonil + tiran)
0,1
++
+
+
+
1,0
+
+
+
+
10
+
+
+
+
100
+
+
+
+
1000
+
+
+
+
(procimidona)
0,1
+ + + +
+ + + +
+ + +
+ + + +
1,0
+ + +
+ + +
+ + + +
+ + +
10
+
+
+
++
100
+
+
++
++
1000
+
+
++
++
Selectividad: (-) ausencia: 0%; (+) malo: 0-25%; (++) regular: 25-50%;
(+++) bueno: 50-75%; (++++) muy bueno: 75-100%.
Índices de velocidad de emergencia para diferentes productos comerciales basados en Trichoderma
Según el Gráfico 1, el tratamiento de semillas con Trichoderma no afecta la velocidad de aparición, el tratamiento con el bioproducto (T. asperellum) fue mayor, presentando los mayores promedios de velocidad de emergencia, considerando tanto con como sin inoculación del hongo Esclerotinia sclerotiorum.
Para semillas inoculadas con el hongo, el producto (T. asperellum) presentó los mejores promedios para velocidad de emergencia, siendo el único que difiere del control.
Gráfico 1 - Velocidad promedio de emergencia de semillas tratadas con Trichoderma spp, con y sin inoculación de S. esclerotiorum. Uberlândia-MG, 2011
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